Qu'est-ce que électrophorèse sur gel d'agarose ?

L'électrophorèse sur gel d'agarose est une technique couramment utilisée en biochimie et en biologie moléculaire pour séparer les acides nucléiques, tels que l'ADN et l'ARN, en fonction de leur taille.

L'agarose est un polymère extrait des algues marines et est souvent utilisé comme matrice de gel en raison de sa faible toxicité, de sa facilité d'utilisation et de sa capacité à former des pores de différentes tailles en fonction de la concentration utilisée.

Pour effectuer une électrophorèse sur gel d'agarose, on commence par préparer le gel en faisant fondre l'agarose dans un tampon approprié, puis en le coulant dans une cuve d'électrophorèse. Une fois durci, le gel forme une matrice tridimensionnelle dans laquelle les acides nucléiques peuvent migrer.

Avant de charger l'échantillon sur le gel, il est souvent nécessaire de le mélanger avec un tampon de charge qui peut contenir du bromure d'éthidium pour visualiser l'ADN sous une lumière ultraviolette. L'échantillon est ensuite déposé dans des puits individuels sur le gel.

Une fois que l'échantillon est chargé, une différence de potentiel électrique est appliquée à travers le gel, de sorte que les acides nucléiques chargés négativement migrent vers l'anode. Les grandes molécules d'ADN ou d'ARN ont plus de mal à se déplacer à travers les pores de gel, ce qui entraîne une séparation basée sur leur taille.

Après une durée de migration déterminée, l'alimentation électrique est arrêtée et les acides nucléiques présents dans le gel peuvent être visualisés à l'aide d'un colorant fluorescent ou d'un agent de marquage approprié. Les bandes d'ADN ou d'ARN peuvent être photographiées ou découpées du gel et récupérées pour une analyse plus poussée.

L'électrophorèse sur gel d'agarose est une technique courante utilisée dans de nombreux domaines de la recherche biomédicale, tels que la génétique, la biologie cellulaire et la biologie moléculaire. Elle permet une séparation rapide et efficace des acides nucléiques en fonction de leur taille, facilitant ainsi leur étude et leur analyse.

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